Стволовые клетки – это первые незрелые клетки, способные к размножению, самообновлению, дифференциации и трансформации в различные другие типы клеток. Именно они становятся теми «базовыми ячейками» и «строительным материалом», из которых развиваются наши органы, иммунная система и кровь. Содержащие в себе генетическую информацию и схему развития организма, стволовые клетки обеспечивают его рост и восстановление на протяжении всей нашей жизни: они становятся клетками , крови, мышц, костей, сердца, мозга и всех тех тканей, из которых состоят наши органы и тело.

При получении сигнала о поражении тканей стволовые клетки направляются в очаг, и именно в этой зоне трансформируются в те клетки, которые нужны для восполнения полученных утрат. Такая стимуляция нашего организма приводит к началу активной регенерации тканей и органов. Например, у человека произошел , и в стадии реабилитации наблюдается постепенное восстановление утраченных функций. Причиной таких процессов являются именно стволовые клетки, которые постепенно достигают пораженных тканей, трансформируются в клетки, окружающие поврежденные ткани, и восстанавливают их.

Намного больше стволовых клеток присутствует в организме у детей и молодых людей, а с годами их становится значительно меньше, и их запасы не восстанавливаются. У эмбриона на 10 тыс. клеток приходится 1 стволовая, а у человека 60-70 лет из 8 млн. обычных клеток только одна является стволовой. Именно поэтому с годами процесс регенерации после перенесенных болезней или травм происходит сложнее и с большим количеством осложнений.

Впервые термин «стволовые клетки» появился в 1908 году, и ввел его петербуржский врач-гематолог А. Максимов. Его последователем стал гематолог С. Воронцов, работавший над этими же научными исследованиями в Париже, а в 60-70-е годы внушительный вклад в исследования был внесен И. Чертковым и А. Фриденштейном. Использовать стволовые клетки для лечения тяжелых заболеваний, поддававшихся лечению только при помощи костного мозга, стали только в 80-е годы.

Впервые стволовые клетки, полученные из крови, собранной из пуповины, были применены для лечения в 1988 году во Франции и США. Больному анемией ребенку Фанкони были трансплантированы стволовые клетки, выделенные из пуповинной крови его сестры. После этого банки для сохранения пуповинной крови начали создаваться в Европе, США и России.

Исследования о генетических модификациях стволовых клеток и методах их наращивания проводятся во всем мире. В будущем они могут стать единственным способом избавления от таких тяжелых и опасных заболеваний, которые невозможно вылечить при помощи медикаментов или хирургических вмешательств. Сегодня развитие медицины позволяет вводить стволовые клетки в организм и направлять их в необходимом при том или ином клиническом случае направлении. Именно поэтому многие люди стали задумываться о необходимости их сохранения в специализированных банках. Ведь такая возможность максимизирует их способность воспользоваться открывающимися в перспективе достижениями медицины.

В этой статье мы ознакомим вас с источниками и видами стволовых клеток, достоинствами и недостатками их применения, списком заболеваний, при которых они используются для лечения, мифами об использовании клеточных технологий для лечения в нашей и других странах. Эта информация будет полезна для вас и убережет от последствий, которые несут услуги аферистов, предлагающих введение стволовых клеток.

Источники получения и виды стволовых клеток

Основными источниками получения стволовых клеток являются:

• костный мозг;
• ткани эмбриона;
• пуповинная кровь;
• плацента.

В печени, мышцах, головном мозге, коже, кишечнике и красном костном мозге взрослого человека присутствуют пролиферирующие тканеспецифические клетки. В последние годы в тканях взрослого организма удалось выявить и такие клеточные элементы, которые могут мигрировать в другие ткани in vivo и дифференцироваться не только в тканеспецифическом направлении, но и в клетки другого тканевого типа. Такой процесс получил название «пластичность». Вероятность, что в будущем он даст возможность изменить концепцию генной и клеточной терапии.

На сегодняшний день ученые смогли получить такие типы стволовых клеток:

• гемопоэтические;
• мезенхимные;
• нервные;
• мышечные;
• кожные;
• клетки кишечника;
• кардиомиоциты;
• эндотелиальные.

Мультипонетные стволовые клетки взрослого организма

ГСК – гемопоэтические клетки

Одним из источников стволовых клеток является красный костный мозг. Стромальные клетки получаются из него во время пункции. Затем их мобилизируют в условиях специальной лаборатории, наращивают и трансплантируют в организм. Даже из одной такой клетки возможно производство колоний стромальных клеток. Поступая в организм, они под воздействием особых сигнальных веществ направляются к месту поражения и, «забывая» о своем костномозговом происхождении, под воздействием определенных факторов трансформируются в необходимые ткани (нервные, кардиомиоциты).

Исследования показывают, что уже через 14 дней после введения в культуру стромальных клеток особого сигнального вещества они трансформируются в нервные клетки. А 90% стромальных клеток, введенных в зону , дифференцируются в каридиомиоциты. Однако стволовые клетки, полученные от взрослого человека, обладают меньшей функциональной активностью, т. е. возможность их «волшебного перерождения» уже ограничена. Помимо этого, такие клетки могут вводиться только тому человеку, из костного мозга которого они были забраны, и не могут быть донорским материалом.

Стволовые клетки из крови, пуповинной крови и плаценты

Некоторое количество стволовых клеток находится в периферической крови и других тканях и органах. Большое их количество может получаться именно из крови, забранной из пупочной вены у новорожденного непосредственно после рождения. После сбора биоматериал с стволовыми клетками из пуповинной крови помещается в специализированный криобанк и может использоваться для восстановления практически любого органа или ткани.

В США была разработана методика получения стволовых клеток и из тканей плаценты: там их содержится в 10 раз больше, чем в пуповинной крови. Такие клетки способны трансформироваться в клетки крови, мышц, кожи и нейроны, но создание биобанков для их хранения требует больших финансовых затрат и поэтому в России и других странах СНГ таких криобанков практически нет.

Именно пуповинная кровь в виде источника стволовых клеток имеет ряд весомых преимуществ перед другими их источниками. Преимущества таких гемопоэтических клеток заключаются в следующем:

• полностью инфекционно безопасны;
• могут использоваться в любой момент;
• безболезненный и легкий способ забора биоматериала (в отличие от костного мозга и крови из периферических вен);
• идеально совместимы при необходимости их трансплантации близким родственникам (сестрам, братьям, матери);
• могут использоваться для лечения других людей при условии их совместимости по антигенам;
• использование не вызывает этических проблем, которые связаны со способом забора материала и его утилизации (в отличие от эмбриональных стволовых клеток).

После забора кровь в пробирках помещают в жидкий азот и сохраняют в специальных криокамерах при температуре -196 °C в условиях приспособленных для этого банков пуповинной крови. Впервые такой биобанк был создан в 1992 году, а сегодня в мире существует более таких 400 банков. Большинство из них являются частными и предоставляют услуги по сохранению полученного при рождении ребенка биоматериала и изъятию биодепозита для лечения членов семьи. Как правило, частные биобанки пуповинной крови заключают договор с клиентами на 15-17 лет, и на протяжении этого времени биоматериал полностью сохраняет свою активность. После достижения совершеннолетия депозит становится собственностью ребенка, чья пуповинная кровь была сохранена.

Другой тип таких биобанков – государственные. В них сохраняются образцы биоматериалов, которые были предоставлены родителями после рождения ребенка безвозмездно. Воспользоваться такими биодепозитами для лечения может любой человек, которому по иммунологическим показателям подходит пуповинная кровь. Цена такой донорской крови составляет около 20 тыс. долларов, и примерно такая же сумма понадобится семье больного для проведения поиска и анализов на совместимость стволовых клеток.

Государственные банки пуповинной крови функционируют на территории таких стран как США, Россия, Канада, Южная Корея, Испания, Германия, Япония, Хорватия и др. Для обмена информацией и тесного сотрудничества в 1988 году была создана крупная система NetCord, которая объединяет некоммерческие общественные банки крови, находящиеся на территории таких стран как Израиль, США, Япония, Австралия и страны Европы. Вторым крупным регистром доноров костного мозга и пуповинной крови стала КМ.

На территории РФ функционируют такие криобанки:

• «Банк стволовых клеток ДЗМ», прикрепленный в 2013 году к «Станции переливания крови Департамента здравоохранения города Москвы»;
• Банк стволовых клеток «КриоЦентр» (г. Москва);
• ООО Криомедика (г. Москва);
• Гемабанк (г. Москва и г. Санкт-Петербург);
• Банк Стволовых Клеток Флора-Мед (г. Москва);
• ООО Транс-Технологии (г. Санкт-Петербург);
• Казанский Банк Стволовых Клеток;
• Поволжский Банк Гемопоэтических Клеток (г. Самара).

В Украине функционируют такие криобанки:

• частный Семейный банк пуповинной крови ГЕМАФОНД (г. Киев);
• «Первый криобанк стволовых клеток пуповинной крови» на базе Института клеточной терапии (г. Киев);
• криобанк на базе Международного центра биотехнологий «Биостэм» (г. Киев).

МСК – мезенхимные клетки

Такой вид стволовых клеток получается из стромы костного мозга и был выявлен в пуповинной крови и образцах костной и жировой ткани, оставшихся после пластических операций. Сейчас ведется множество разработок по выделению МСК в достаточных количествах из пуповинной крови или костного мозга. В дальнейшем такой вид стволовых клеток может стать одним из ведущих элементов клеточной терапии, т. к. МСК возможно получать от самого больного и они способны быстро делиться и дифференцироваться в мышечные, хрящевые, костные, жировые, нервные и другие ткани организма.

После забора материала клетки могут культивироваться и размножаться на специальных питательных средах, а из небольшого образца биоптата костного мозга можно вырастить необходимое для трансплантации количество МСК. При необходимости они могут подвергаться криоконсервированию, и после размораживания сохраняют не только все свои качества, но и возраст взятого биоматериала. Кроме этого, МСК после трансплантации способны направляться в зоны гибели клеток и не вызывают онкологических осложнений.

Единственным недостатком такого способа получения стволовых клеток является необходимость жесткого инфекционного контроля материала при его культивировании.

НСК – стволовые клетки нервной ткани

НСК располагаются в специфических областях головного мозга сформировавшегося или еще созревающего организма. В ходе многочисленных исследований стволовые клетки нервной ткани были выявлены в печени, сердце, легких, кишечнике и тканях центральной нервной системы.

Несмотря на высокие дифференциальные способности НСК и возможность их культивирования в условиях in vivo, практическое использование такого типа клеточной терапии весьма сложная задача, т. к. для их выделения требуется полное разрушение головного мозга, и этот факт делает невозможным применение НСК как аутологичного материала.

Для преодоления этих преград проводятся исследования по использованию чужеродного материала, который получается из тканей реципиента. Такие эксперименты на животных и людях уже были проведены при лечении .

Стволовые клетки кожи

Стволовые клетки кожи могут выделяться как из кожных покровов эмбриона, так и с кожи взрослого человека. Разработки ученых по использованию такого материала уже применяются в клиниках для лечения ожогов.

Стволовые клетки миокарда

Впервые стволовые клетки, которые способны трансформироваться в кардиомиоциты и эндотелий, были выделены из тканей сердечной мышцы новорожденных крыс в 90-х годах. При введении в организм они способны полностью восстанавливать поврежденные ткани миокарда, но их получение от человека остается в данное время невозможным из-за необходимости полного разрушения сердечной мышцы.

Для лечения инфаркта миокарда и его осложнений применяются методики клеточной терапии по введению ГСК. После трансплантации они с током крови попадают к пораженному участку миокарда и начинают заменять отмершие ткани на здоровые. В результате сердечная мышца полностью восстанавливается, способна сокращаться и регулировать сердечный ритм, и на ней не остается рубцовых изменений.

Стволовые клетки скелетных мышц

Скелетные клетки выделяют из поперечнополосатых мышц, и они способны к перерождению в мышечные, жировые, хрящевые и нервные ткани. Рядом исследователей были выявлены факты о том, что такой вид стволовых клеток является отдельной популяцией МСК и в дальнейшем может получаться из биоптата костного мозга или образцов пуповинной крови.

Эмбриональные стволовые клетки

Стволовые клетки из абортивного материала

Для получения фетальных клеток используется биоматериал, полученный при прерывании беременности на 9-12 неделе. Такой источник получения сегодня практикуется наиболее часто.

Использование такого вида стволовых клеток сопряжено с рядом этических, технических и юридических сложностей:

• невозможность использования аутологичного материала;
• присутствие риска отторжения трансплантатов;
• присутствие риска заражения , вирусным гепатитом, цитомегаловирусной и другими инфекциями при использовании некачественно проверенного материала;

ЭСК – эмбриональные стволовые клетки

Эмбриональные стволовые клетки получают из внутреннего материала эмбриона (на 4-7 день его развития). Именно из них в дальнейшем может формироваться весь организм. Трансплантация ЭСК обладает рядом преимуществ и недостатков.

Преимущества ЭСК:

• способность трансформироваться в несколько типов клеток (нейроны, мышечные, кожные клетки, красные кровяные тельца, кардиомиоциты, клетки и др.);
• редкие случаи отторжения трансплантатов.

Недостатки ЭСК:

• риск формирования доброкачественных опухолей;
• этические трения и юридические аспекты.

Пока использование эмбриональных клеток запрещено Министерством здравоохранения и социального развития РФ. Оппоненты такого метода получения стволовых клеток полагают, что их использование неэтично, т. к. является своего рода посягательством на жизнь еще не рожденного человека и может подтолкнуть женщин к желанию прерывать беременность с целью материального обогащения. Этот факт мотивировал ученых попытаться получить ЭСК из 3-х недельного эмбриона овцы. По мнению исследователей из клиники «Medileen» они способны дифференцироваться в клетки многих, но не всех типов. В процессе исследований свежевыделенные клетки трансплантировались больным с печеночной недостаточностью. 81% таких эмбриональных клеток трансформировался в гепатоциты и активно функционировали на протяжении года, устойчиво продуцируя альбумин.

Такие эмбриональные клетки получаются от «чистой линии» животных, т. е. выращенных в лабораторных условиях и прошедших контроль на наличие вирусных, инфекционных и наследственных болезней. Они не вызывают иммунных отторжений и их качество повышается путем введения в них «сигнальных агентов», обеспечивающих их связь только с определенными пораженными тканями. Исследования ученых из «Medileen» опровергает мнение некоторых российских ученых, утверждающих, что приживление эмбриональных клеток, полученных от животных, у человека невозможно и открывает перед клеточной терапией еще одно перспективное направление в лечении различных дегенеративных заболеваний.

Применение стволовых клеток

Медицина

Впервые стволовые клетки применили для лечения анемии Фанкони у шестилетнего мальчика в 1988 году во Франции. Трансплантация была Э. Глюкманом проведена в клинике Святого Людвига (г. Париж). С таким диагнозом человек редко доживает до 30-ти летнего возраста. Сегодня у этого пациента наблюдается полное иммунологическое и гематологическое восстановление, он женат и воспитывает собственного ребенка.

Позднее методики клеточной терапии стали применяться для лечения инфарктов миокарда, злокачественных опухолей, инсультов, травм и ожогов. Сегодня спектр применения клеточной терапии стал намного шире, и в мире проведено десятки тысяч успешных трансплантаций стволовых клеток взрослым и детям.

Введение стволовых культур проводится для лечения инсультов, травм головного и повреждений спинного мозга. После их поступления в пораженные ткани у больных восстанавливаются нервные клетки и капиллярная сеть в пораженном участке мозга.

Благодаря достижениям клеточной терапии стало возможным исцеление детей со злокачественными заболеваниями крови. Трансплантация костного мозга проводится во многих гематологических клиниках, а трансплантации ГСК практикуется в крупных гематологических центрах.

В последние несколько лет в ортопедии применяются мезинхимальные стволовые клетки. С их помощью становится возможным восстановление костных дефектов после сложных переломов и суставных хрящей. Прямое введение МСК в последние 2-3 года стало применяться для восстановления сердечной мышцы после инфаркта миокарда.

Гемопоэтические стволовые клетки применяются для лечения таких тяжело поддающихся терапии заболеваний как болезнь Паркинсона, красная волчанка, аутоиммунные артриты, болезнь Крона и . В перспективе клеточная терапия может стать единственным шансом на жизнь для тех 75% пациентов, которые нуждаются в пересадке внутренних органов, но погибают в его ожидании.

Перечень заболеваний, для лечения которых применяются стволовые клетки:

• анемия Фанкони;
• идиопатическая ;
• адренолейкодистрофия;
• коллагенозы;
• талассемия;
• болезнь Гюнтера;
• синдром Костмана;
• синдром Бара;
• резистентный ювенильный артрит;
• амегакариоцитозная тромбоцитопения;
• иммунодефицитные состояния;
• синдром Леш-Нихана;
• синдром Харлера;
• миелодиспластический синдром;
• нейробластома;
• неходжкинская лимфома.

Косметология

Стволовые клетки могут применяться для решения таких косметических проблем как рубцы, облысение, кожная пигментация, морщины и последствия применения агрессивных химических веществ или лазера. Стволовые клетки вводятся при помощи мезотерапии, и благодаря использованию таких методик у пациентов исчезают морщины, улучшается тонус и внешний вид кожи, исчезают пятна после акне и пигментации, восстанавливается рост волос и ногтей.

Такая эффективность клеточной терапии, к сожалению, породила появление множества поддельных . Именно поэтому следует проявлять бдительность и покупать средства только в косметологических клиниках и салонах с хорошей репутацией.

Стоимость лечения

Стоимость лечения стволовыми клетками достаточно высока. Например, в России она колеблется от 240 тыс. до 350 тыс. рублей. Такая высокая цена оправдывается достаточно сложными и высокотехнологичными процессами по выращиванию биоматериала.

За эту цену человеку вводится 100 млн. клеток на один курс. Стоимость самой процедуры введения оплачивается отдельно.

Процедуры по мезотерапии стволовыми клетками более доступны. Для получения выраженного эффекта омоложения кожи необходимо проведение 5-10 сеансов, а стоимость каждого из них составляет 15-30 тыс. рублей.

Мифы и факты о клеточной терапии в странах бывшего СССР

Назойливая реклама клеточной терапии, заполонившая СМИ и интернет, сулит исцеление от всех болезней. Но многие клиники используют ее исключительно в целях легкого обогащения. Такие недобросовестные частные учреждения используют некачественные (уже отмершие) или непроверенные трансплантаты. В результате пациенты попросту лишаются своих денег, не получая долгожданного лечебного эффекта, а в худших случаях такая «псевдоклеточная терапия» приводит к инфицированию, обострениям заболеваний или развитию раковых опухолей.

Стволовые клетки являются необычным лекарственным средством, и использовать такие клеточные технологии могут только специалисты мирового уровня, работающие в специализированных центрах. Методики имеют четкие показания и противопоказания. В ряде случаев их введение может быть противопоказанным или обладать побочными эффектами, которые бывает сложно предугадать.

Частными криобанками порой проводится агрессивный маркетинг, который вводит в заблуждение людей, страдающих такими тяжелыми заболеваниями как сахарный диабет, болезни Альцгеймера, Паркинсона и др. На самом деле лечение этих тяжелых недугов пока проводится только на экспериментальном уровне, и такие методики проходят стадии исследований и доработок.

На территории России применение клеточных технологий (кроме пересадки костного мозга) запрещено законом (ОБНОВЛЕНИЕ: разрешено в начале 2017 года

На самом деле получать (в смысле, искусственно синтезировать) стволовые клетки не нужно. Все, что есть у человека, используется в «первозданном» виде. Перед учеными стоит несколько задач: получение, выделение, обогащение, контрольная проверка и использование или длительное хранение. Постараемся в общих чертах простыми словами пояснить, что происходит на каждом этапе.

Получение

В настоящее время известны несколько источников стволовых клеток. Это красный костный мозг взрослого человека или ребенка, в том числе свой собственный. В первом случае мы имеем дело с аллотрансплантацией, а во втором – с аутоторансплантацией. Красный костный мозг является основным источником стволовых клеток, которые используют, главным образом, для его пересадки. Необходимость в этом возникает при различных злокачественных заболеваниях крови.

Второй источник стволовых клеток – это жировая ткань и другие ткани с хорошим кровоснабжением. Из нее выделяются мезенхимальные клетки, но они используются только в научных экспериментах, поскольку они встречаются также в красном костном мозге.

Второй реальный источник стволовых клеток – это пульпа молочных зубов, которые выпадают в детстве. Там находятся те же самые мезенхимальные стволовые клетки организма , но, как считается, их потенциал к трансформации в другие ткани и клеточные массивы организма более высок. Забор стволовых клеток из молочных зубов происходит или сразу их выпадения либо путем бережного удаления после выяснения, что зуб шатается, и его жизнь подошла к концу.

Третий, самый популярный источник стволовых клеток организма , – это пуповинная кровь . Как известно, после рождения малыша и пересечения пуповины она становится «ничьей» и подлежит утилизации согласно правилам утилизации биологических отходов. Именно из пуповины после ее отделения от материнского организма и организма малыша и производится забор пуповинной крови . Количество крови составляет от 40 до 80 мл, и из нее можно получить значительное количество стволового концентрата.

Нелегальные способы получения

Дальше, в принципе, может использоваться фетальный и эмбриональный материал. Однако законодательство практически всех стран запрещает использовать материал, полученный при абортах в коммерческих целях, поскольку это способствует резкому росту криминальных абортов, появлению подпольных клиник, нацеленных на получение прибыли, и другим, связанным с этими проблемами трудностям. Но, несмотря на это, подобные услуги низкого качества оказываются в ряде стран. Среди популярных видов трансплантации стволовых клеток, полученных преступным путем, – операции по «омоложению», а также попытки лечить онкологические заболевания в тех случаях, когда все другие возможности исчерпаны.

Контрольная проверка

Каждая уважающая себя лаборатория, имеющая безупречную международную репутацию, например Cofrance, связанная с родильными домами и банками хранения стволовых клеток пуповинной крови , проводит дополнительную проверку полученного нативного, или свежего, материала. Проверка в основном сводится к исследованию на опасные болезни, которые передаются трансмиссивным путем, то есть с помощью передачи крови и ее компонентов, к которым юридически и относятся стволовые клетки .

В обязательном порядке кровь перепроверяется на ВИЧ-инфекцию, вирусные гепатиты, а также проводится подтверждение группы крови и резус-фактора. Здесь имеются юридические особенности: конечно, если у донора-малыша имеется вирусный гепатит, и его кровь инфицирована, он может всю жизнь выделять вирус, болеть долгие годы, и будет совсем не против, чтобы ему ввели его собственные клетки.

Но лабораториям запрещено иметь дело с контагиозными биологическим средами. Для этого существуют специальные лаборатории, в частности, в институте вирусологии. Самое главное, что подобная инфицированная кровь не может находиться вместе с другими образцами, полученными от здоровых доноров. Спустя много лет этот эпизод может забыться, и если такие стволовые клетки введут другому человеку (по решению заказчика, например, его брату), то возможно грандиозное судебное разбирательство вследствие заражения, вызванного применением биологического препарата.

Стволовые клетки могут быть получены из периферической крови, из жира или из костного мозга пациента. Из периферической крови можно получить, в основном, гемопоэтические стволовых клеток. Процедура их выделения занимает 4-6 ч и требует специального оборудо­вания. Пациенту делают укол, стимулирующий выброс в кровь стволовые клетки из костного мозга за несколько дней до процедуры. Обычно-это делается в специализированных гематологических клини­ках при лечении некоторых болезней.

Получение стволовые клетки из жира начато недавно, но уже получены хорошие результаты. В кост­ном мозге концентрация стволовые клетки наиболее высока, методики за­бора костного мозга и выделения из него двух типов С К давно и хорошо отработаны. Как гемопоэтические стволовых клеток, так и мезен-химальные стволовые клетки костного мозга могут быть размножены и затем возвращены пациенту.

Гемопоэтические стволовые клетки находятся в кроветворных органах и крови. Это клетки - предшественники зрелых клеток крови. Трансплантации костного мозга широко применяются в меди­цине, т. Костный мозг - одно из тех мест, где эти клетки со­держатся, Для пересадки используют мозг от подходящего до­нора. Тем не менее, приходится подавлять иммунную систему пациента, чтобы пересаживаемая ткань стала «своей». Гораздо эффективнее и безопаснее было бы применять собственные гемопоэтические клетки. Развитие гемопоэтической стволовые клетки про­исходит следующим образом. В желточном мешке у эмбриона начинается гемопоэз, т. Е. Процесс образования, развития и со­зревания клеток крови, по мере развития эта функция перехо­дит к печени плода, а затем к костному мозгу, в котором она сосредоточена в течение всей жизни.

Гемопоэтическая стволовые клетки дает тачало всем элементам кровд, заполняет другие гемо- и лимфопоэтические органы и, самовоспроизводясь, превращается 15 новые стволовых клеток. Она плюрипотентна. Одним из наиболее важных примеров взаимодействия гемопоэтических клеток является способность трансплантированных С К возвращаться в кост­ный мозг. Такой процесс носит название «хоуминг». Благодаря росту и самообновлению стволовые клетки способны воспроизводиться. Основным маркером гемопоэтических стволовые клетки является СП34 - бе­лок, присутствующий па их поверхности. Гемопоэтические стволовые клетки из пуповинной крови имеют большое преимущество перед та­кими же клетками из костного мозга и периферической крови. Во-первых, сам сбор пуповинной крови совершенно прост и не вызывает неприятных реакций. Этот сбор занимает всего ми­нуту. Сбор же костного мозга проходит под общим наркозом и длится несколько часов. Клетки из пуповинной крови редко, в’отличие от их «собратьев» - костного мозга и перифериче­ской крови, отторгаются организмом, вызывая осложнения. Одно из основных преимуществ этого вида клеток состоит в том, что они намного моложе клеток из костного мозга. По способности к пролиферации (увеличению числа клеток ка­кой-либо ткани вследствие их размножения) и формированию колоний при культивировании т уиго (способности формиро­вать различные ростки кроветворения) стволовые клетки пуповинной крови значительно превосходят клетки из других источников.

Стандартная для трансплантации доза ядерных клеток пуповинной крови, равная 3-4?107 клеток/кг, содержит примерно столько же колониеобразующих единиц, сколько 3-5?108 клеток костного мозга или стимулированной перифе­рической крови. При этом трансплантация выполняется при гораздо меньшем количестве вводимых общих лейкоцитов.

Содержание СБ34-положительных клеток в пуповинной крови, обычно не превышающее 0,5%, существенно ниже их концентрации в костном мозге или стимулированной крови. Доза же СВ34-положительных клеток пуповинной крови также примерно в 10 раз меньше дозы аналогичных."взрос­лых" клеток. Объяснение этому факту может быть только одно: клетки пуповинной крови менее дифференцированы («моложе») и обладают наивысшим потенциалом к росту и дифференцировке.

Стволовые клетки пуповинной крови имеют более высокий уровень сте­пени развития антигенов, большую длину концевого участка хромосомы и более высокую активность теломераз фермента, который контролирует размер и количество теломеров хро­мосом. Сокращение длины теломеров является одним из при­знаков старения клеток. Это означает, что клетки пуповинной крови, введенные в организм реципиента, обладают большей способностью к длительному существованию.

Приведенные выше свойства стволовые клетки пуповинной крови крайне важны при разработке клинических протоколов их практиче­ского применения, хотя для полной реализации потенциала

стволовые клетки требуются дальнейшие углубленные исследования свойств этой уникальной клеточной разновидности.

По статистике, лишь каждый 4-й образец пуповинной крови содержит стволовые клетки в количестве, достаточном для трансплантации взрослому пациенту. Поэтому существуют ограничения при­менения стволовые клетки пуповинной крови. Ученые и практические врачи пытаются найти выходы из этого положения. Проводятся ис­следования по комбинированию (пулированию) нескольких совместимых образцов.

Другие пути получения стволовых клеток

Второй возможный путь получения стволовых клеток - размножение стволовые клетки и увеличение массы трансплантата.

При введении стволовые клетки непосредственно в костный мозг (а не внутривенно, как это обычно практикуется) они сразу оказы­ваются в нужном микроокружении, а эффективность транс­плантации значительно повышается. Но пока эксперименты проводятся только на животных.

Еще одним методом, способным существенно повысить число годных для трансплантации образцов пуповинной крови, является перфузия плаценты, т. Е. Промывка сосудов биологи­чески активными веществами, физиологическими растворами крови или др. Жидкостей.

Можно также выделить подгруппу эмбриональных стволовых клеток, по­лучаемых путем терапевтического клонирования. У пациента берут соматические клетки и удаляют из них ядра с генетиче­ской информацией. Затем берутся донорские яйцеклетки. Из этих яйцеклеток также удаляется ядро и на его место вводится ядро клетки ткани пациента, несущее его наследственную ин­формацию. В лабораторных условиях она делится до стадии бластоцисты - раннего эмбриона, который на 4-7 день состоит из 30-150 клеток.

Стволовые клетки - это иерархия особых клеток живых организмов, каждая из которых способна впоследствии изменяться (дифференцироваться) особым образом (то есть получать специализацию и далее развиваться как обычная клетка). Отличие стволовых клеток состоит в том, что они могут делиться неограниченно, пока не "превратятся" в зрелые, а зрелые клетки обычно имеют ограниченное количество циклов деления.

Согласно современным гипотезам и представлениям, у млекопитающих существуют стволовые клетки для всех видов тканей и органов на протяжении всего срока жизни индивидуума.

Более того, имеются данные, что существует единая мультипотентная (универсальная) стволовая клетка. Дальнейшая ее специализация определяется набором стимулов, с которыми эта клетка встречается в организме.

Убедительно доказано, что из этих клеток происходят не только все ростки кроветворения, но и другие клетки организма. При определенных условиях из стволовой клетки крови можно получить клетку скелетной мускулатуры, клетку сердечной мышцы, вырастить настоящую кость и хрящ, и, даже, вырастить клетку головного мозга - нейрон. Эти лабораторные данные нашли свое применение в клинике. С помощью трансплантации клеток крови делаются первые шаги в лечении заболеваний скелетных мышц (миопатия Дюшена), эндокринной патологии (сахарный диабет), дегенеративных болезней центральной нервной системы (болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз). Лечение острого инфаркта миокарда с применением стволовых клеток вышло за рамки эксперимента и вошло в клиническую практику. Периодические переливания клеток, полученных на ранних этапах жизни , могут способствовать замедлению процессов старения. Трансплантации стволовых клеток, которым приданы определенные свойства методом генной инженерии, делает первые успешные шаги.

Учитывая скорость развития биотехнологий, можно уверенно прогнозировать появление программ с использованием трансплантаций модифицированных стволовых клеток крови для лечения инвалидизирующих и неизлечимых в настоящее время заболеваний.

В насотящее время в мире каждый год по поводу различных заболеваний проводится более 20000 трансплантаций стволовых клеток.

Источники стволовых клеток

Наиболее богата стволовыми клетками пуповинная кровь новорожденного. Эти стволовые клетки, кроме прочего, имеют наибольшую способность к делению и специализации, и не подверглись влиянию внешней и внутренней среды.

Процедура сбора пуповинной крови хорошо разработана и безопасна для матери и ребенка. С начала 90-х годов в США, Европе, Японии, Австралии, а сейчас и в Росси по желанию родителей практикуется сбор, заморозка и пожизненное хранение клеток пуповинной крови новорожденного. К настоящему времени в банках хранится более 100000 образцов.

Вторым источником стволовых клеток является костный мозг человека. При определенных условиях стволовые клетки выходят в периферическую кровь и циркулируют там непродолжительное время.

За последние два десятилетия разработана методика, позволяющая получать стволовые клетки из крови и хранить их длительно без потери свойств. Эта методика предусматривает предварительную стимуляцию кроветворения донора для увеличения содержания интересующих клеток в кровотоке в десятки раз и их забор с помощью клеточного сепаратора крови.

По мере старения организма капитал стволовых клеток истощается, существенно снижается их способность к делению, замедляются процессы жизнедеятельности, что приводит к нарушению функций органов и систем, старению организма, может являться причиной возникновения опухолей. Чем раньше собраны и законсервированы стволовые клетки, тем больше их потенциал в плане восстановления утраченных функций. Таким образом, каждый человек может стать донором стволовых клеток для самого себя.

Крупные научные медицинские центры Российской Федерации, например, ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина, РАМН, Кардиологический научный центр им. Бакулева и др., разработали и внедрили протоколы лечения больных, с использованием стволовых клеток крови.

Изучаются возможности выделения и применения стволовых клеток из менструальной крови женщин детородного возраста.

Эффективность клеточной терапии показана и доказана в следующих областях медицины:

1. Онкология (трансплантация стволовых клеток крови собственно больного или здорового донора при заболеваниях крови или солидных опухолях).
2. Гематология (трансплантация клеток крови донора при приобретенных или врожденных апластических анемиях).
3. Радиомедицина (острая и хроническая лучевая болезнь).
4. Иммунология (врожденные иммунодефицитные состояния).
5. Воспалительные заболевания (ревматоидный артрит, системная красная волчанка).
Клинические испытания, проведенные за последние десятилетие, расширили показания к клеточной терапии и позволили ее внедрить в:
1. кардиологию (трансплантация клеток в очаг инфаркта миокарда, терапия атеросклероза);
2. неврологию (реабилитация после травм и заболеваний головного и спинного мозга);
3. травматологию и ортопедию (лечение длительно заживающих переломов костей).

Также получены положительные результаты применения стволовых клеток в комплексном лечении врожденных заболеваний (болезни накопления, пример болезнь Гоше, Неймана-Пика).

В ближайшей перспективе (5-10 лет) лечение больных сахарным диабетом, дегенеративными заболеваниями, путем трансплантации модифицированных или клонированных стволовых клеток донора (методами генной инженерии)

В связи с высокой ценностью стволовых клеток, как «строительного материала» для организма больного человека, предлагается следующая программа сбора, криоконсервирования и длительного хранения кроветворных стволовых клеток крови, полученных из пуповинной крови новорожденного ребенка или периферической крови взрослого человека.

Получение стволовых клеток из пуповинной крови

Пуповинная кровь принадлежит новорожденному ребенку и содержит в несколько раз больше стволовых клеток, которые находятся на разных степенях зрелости, чем кровь взрослого человека. До конца 80-х годов прошлого века пуповинная кровь практически не использовалась для нужд ребенка или его родителей. Первые трансплантации стволовых клеток пуповинной крови показали ее эффективность и целесообразности персонального хранения. Если пуповинная кровь не собирается она уничтожается вместе с плацентой. Сбор пуповинной крови после рождения ребенка - уникальная, однократная возможность обеспечить запас стволовых клеток без каких-либо медицинских манипуляций и введения препаратов. Получение стволовых клеток из любых других частей пуповины и плаценты - это широко распространенный миф.

Преимущества пуповинной крови.

1. Сбор пуповинной крови проводится после рождения ребенка и его отделения от матери, путем пересечения пуповины.
2. Процедура сбора крови безболезненна и безопасна как для матери, так и для новорожденного (ребенок уже отделен от пуповины, а плаценты не имеет общих сосудов и нервных окончаний со стенкой матки роженицы).
3. Собирается лишь та кровь, которая находится в сосудах плаценты и пуповины. Это означает, что ни у роженицы, ни у новорожденного кровь не берется.
4. Сбор крови не требует проведения специальных манипуляций и введения каких-либо препаратов.
5. Процедура сбора длится всего несколько минут.
6. Пуповинная кровь – наиболее богатая стволовыми клетками субстанция человеческого организма.
7. В пуповинной крови присутствуют молодые стволовые клетки с неограниченным потенциалом деления и дифференцировки.

Краткое описание метода получения клеток пуповинной крови.

Сбор пуповинной крови осуществляется после рождения ребенка и отделения его от пуповины. Ни мать, ни ребенок не испытывают болевых ощущений. В ряде случаев возможен забор пуповинной крови и после отделения плаценты, если нет сомнения в ее целостности. Кровь собирается в специальную систему с консервантом путем пункции иглой вены пуповины. После того как кровь перетечет из пуповины в специальную систему, ее доставляют в лабораторию для обработки, выделения клеток их консервирования и длительного хранения.

Обследование матери до и после забора пуповинной крови.

Перед тем как собрать пуповинную кровь роженица должна быть осмотрена врачом и обследована на носительство опасных инфекций (гепатит В и С, ВИЧ, сифилис, гонорею и др.). Также необходимо сделать общий и биохимический анализ крови (определить количество форменных элементов крови, глюкозы, билирубина, белка, ферментов и. т.д.).

Подготовка в криоконсервации пуповинной крови и длительное хранение стволовых клеток

После доставки специальной системы с пуповинной кровью в лабораторию проводится выделение стволовых клеток, помещение клеток в специальный контейнер и их замораживание при ультранизких температурах (минус 196 0С). Далее замороженный материал хранится в в индивидуальной ячейке криохранилища под индивидуальным номером. По результатам обработки пуповинной крови оформляется протокол, содержащий описание процедуры и показатели качества материала.

Срок хранения клеток в жидком азоте неограничен.

Получение стволовых клеток у взрослого человека (донора)

Если пуповинная кровь не была заготовлена непосредственно после родов, стволовые клетки могут быть получены из периферической крови здоровых, совершеннолетних доноров при соблюдении определенных условий.

Краткое описание метода получения стволовых клеток.

Процедура условно разделяется на две части

1) Мобилизация стволовых клеток в периферическую кровь:
С целью увеличения количества стволовых клеток в периферической крови донор получает 8 инъекций гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), подкожно с интервалом в 10-12 часов в течение 4 дней. Г-КСФ представляет собой медицинский препарат, полученный путем генной инженерии.

2) Сбор стволовых клеток или получение сепарата:
Осуществляется на 5 день от начала стимуляции Г-КСФ на сепараторе крови с использованием одноразовой системы для сепарации и стандартных растворов. Длительность процедуры составляет не более 3 часов, в зависимости от скорости процедуры, веса донора и параметров анализа крови. Процедура сбора клеток проводится путем забора крови из одной вены, обработки ее внутри сепаратора, забора определенного объема стволовых клеток и возврата остальных компонентов крови донору через другую вену.

Преимущества стволовых клеток крови.

1. Возможность получения из периферической крови без применения общего наркоза с минимальной травматичностью для донора.
2. Возможность проведения многократных и повторных сеансов получения стволовых клеток. 3. Относительная быстрота получения.
4. Быстрое восстановление кроветворения в случае трансплантации, уменьшение времени пребывания в стационаре.

Криоконсервация стволовых клеток.

После доставки сепарата в лабораторию проводится его обработка. Затем клеточный концентрат переводится в специальный криоконтейнер и замораживается при ультранизкой температуре (минус 196 0С). Далее замороженный материал хранится в индивидуальной ячейке криохранилища под индивидуальным номером. По результатам обработки пуповинной крови оформляется протокол, содержащий описание процедуры и показатели качества материала.

Применение стволовых клеток.

Клетки могут быть использованы для лечения гематологических и онкологических больных (трансплантация стволовых клеток крови собственно больного или здорового донора при заболеваниях крови или солидных опухолях). В гематологии, радиомедицине, иммунологии и других областях медицины: трансплантация клеток крови донора при приобретенных или врожденных апластических анемиях; острая и хроническая лучевая болезнь, врожденные иммунодефицитные состояния; рассеянный склероз; ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.

Например, только в одной Москве существует несколько государственных медицинских учреждений, использующих в лечении больных стволовые клетки. Среди них можно выделить такие центры, как: Россйский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, Медико-хирургический центр им. Н.В. Пирогова, Гематологический научный центр, Научный Центр сердечно-сосудистой хирургии им. А. Н. Бакулева РАМН, ФНЦ трансплантологии и искусственных органов имени академика Шумакова и другие.

Благоприятный прогноз трансплантации выше при наибольшем сходстве донора и реципиента по антигенам тканевой совместимости (HLA - human leucocyte antigens - антигены тканевой совместимости, человеческие лейкоцитарные антигены). Подобрать донора, полностью совместимого с реципиентом по антигенам HLA, очень сложно, поскольку число комбинаций, составленных более чем из 100 антигенов этого семейства, чрезвычайно велико. Найти донора, полностью совместимого с реципиентом по антигенам HLA, среди людей, не являющимися его родственниками, почти невозможно. Вероятность подбора полностью совместимого донора среди родных братьев и сестер составляет 1:4, так как гены HLA наследуются по законам Менделя. При наследовании HLA - антигенов ребенок получает по одному гену каждого локуса от обоих родителей, т.е. половина антигенов тканевой совместимости наследуется от матери и половина от отца.

Таким образом, представленная программа сбора, криоконсервирования и длительного хранения стволовых кроветворных клеток поможет обеспечить донора и его близких родственников «уникальными», доступными только для них, стволовыми клетками, а также даст возможность применения клеток в случае необходимости.

Применение стволовых клеток

Для лечения анемии в 1988 году во Франции были впервые применены стволовые клетки. Высокоэффективное лечение стволовыми клетками опухолей, инсультов, инфарктов, травм, ожогов, заставило создавать в развитых странах специальные учреждения (банки) для хранения замороженных стволовых клеток в течение долгого времени.

В такой коммерческий именной банк крови уже сегодня возможно, по заказу родственников, поместить пуповинную кровь ребенка, с тем, чтобы в случае его травмы, болезни, была возможность использовать собственные стволовые клетки.

Пересадка внутренних органов восстанавливает здоровье человека только в том случае, если она проведена своевременно, и не произошло отторжение органа иммунной системой пациента. Примерно 75 % пациентов, нуждающихся в пересадке органов, погибает в период ожидания. Стволовые клетки могут стать идеальным источником «запасных частей» для человека.

Уже сегодня - спектр применения стволовых клеток в лечении самых тяжелых заболеваний очень широк.

Восстановление нервных клеток позволяет восстановить капиллярное кровообращение и вызвать рост капиллярной сети на месте поражения. Для лечения повреждённого спинного мозга используют введение нервных стволовых клеток, либо чистые культуры, которые затем превратятся на месте в нервные клетки.

Некоторые формы лейкозов у детей стали излечимы благодаря достижениям биомедицины. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток применяется в современной гематологии, а трансплантация стволовых клеток костного мозга - в широкой клинике.

Исключительно сложны в лечении системные заболевания, вызванные нарушением функций иммунной системы: артриты, рассеянный склероз, красная волчанка, болезнь Крона. Гемопоэтические стволовые клетки применимы и при лечении этих заболеваниях Имеется практический клинический опыт в применении нейтральных стволовых клеток при лечении болезни Паркинсона. Результаты превосходят всякие ожидания.

Мезинхимальные (стромальные) стволовые клетки уже используют в ортопедической клинике несколько последних лет. С их помощью восстанавливают разрушенные суставные хрящи, костные дефекты после переломов. Кроме того, эти же клетки в последние два-три года используют методом прямого введения в клинике восстановления сердечной мышцы после инфаркта.

С каждым днем пополняется список болезней, которые поддаются лечению стволовыми клетками. И это даёт надежду на жизнь неизлечимым больным.

стволовой клетка эндокринология инфаркт

Применение стволовых клеток в медицине

Будущее клеточной терапии и трансплантологии, а, возможно, и медицины в целом связано использованием стволовых клеток, применяемых с целью замещения структурной и функциональной недостаточности различных органов. Использованию ЭСК в клеточной терапии многих заболеваний препятствует ряд проблем:

технические трудности в получении чистой линии человеческих ЭСК;

недостаток информации об индукции их дифференцировке in vitro;

наличие ряда биоэтических вопросов, которые возникают при использовании ЭСК, полученных из эмбриональной ткани. В ряде стран приняты запретительные ограничения на использование в исследовательской работе эмбриональной ткани человека.

существование риска канцерогенеза. Инъекция ЭСК мышам может формировать опухоли, именуемые тератомами.

иммунологические проблемы отторжения.

В последнее время в литературе уделяется достаточно много внимания РСК, которые найдены почти во всех органах. Основные преимущества РСК заключаются в том, что они могут быть использованы при необходимости как аутогенный клеточный материал. Поэтому не возникает проблем иммунологического отторжения, а также этических препятствий к их использованию. Недостатки и проблемы при использовании

РСК для клеточной терапии связаны с тем, что еще недостаточно изучены факторы их дифференцировки in vitro, их трудно получить в достаточном количестве для развития клинического эффекта после трансплантации. Кроме того, с возрастом их количество и терапевтический потенциал уменьшаются. Хотя о применении СК в различных областях медицины накоплены многочисленные экспериментальные данные, но клинические исследования находятся в основном еще в стадии апробации и требуют анализа и усовершенствования.

Большое внимание ряд исследователей уделяют использованию в медицине СК костного мозга: кроветворных и стромальных клеток.

Выращивая стромальные стволовые клетки (ССК) и получая достаточно большие их количества, можно задавать направление их дифференцировки. Эти клетки способны дифференцироваться в клетки хрящевой, костной, мышечной, жировой тканей, ткани печени и кожи. В ближайшее десятилетие это направление медицинской науки может стать основой для терапии наиболее распространенных заболеваний сердечно-сосудистой и центральной нервной системы, опорно-двигательного аппарата.

Применение СК в кардиологии.

В последние годы сделано несколько ключевых открытий, связанных с применением СК в кардиологии. D. Ortic и соавт. вызывали у мышей повреждение кардиомиоцитов путем перевязки левой главной коронарной артерии. Затем животным вводили в пораженную стенку левого желудочка костномозговые СК, которые вызывали образование кардиомиоцитов, эндотелия и гладкомышечных клеток кровеносных сосудов. В результате удавалось добиться образования нового миокарда, включая коронарные артерии, артериолы и капилляры.

Через 9 дней после начала заместительной клеточной терапии вновь образованный миокард занимал 68% поврежденной территории левого желудочка. Таким образом, удалось заменить «отмерший» миокард живой, активно функционирующей тканью. Установлено, что введение СК в зону повреждения сердечной мышцы (зону инфаркта) устраняет явления постинфарктной сердечной недостаточности у экспериментальных животных. Так, стромальные клетки, введенные свиньям с экспериментальным инфарктом, уже через восемь недель полностью превращаются в клетки сердечной мышцы, восстанавливая ее функциональные свойства.

По данным Американского кардиологического общества за 2000 год у крыс с искусственно вызванным инфарктом 90% СК, введенных в область сердца, трансформируется в клетки сердечной мышцы. В культуре человеческие кроветворные СК, подобно мышиным СК, дифференцируются в разнообразные типы клеток, включая кардиомиоциты.

Первым клиническим применением СК для лечения инфаркта называют исследование, начатое во Франции в 2000 г.: при операции на открытом сердце вводили выращенные в культуре аутологичные скелетные миобласты (более 30 инъекций) в зону инфаркта и периинфарктную зону. В этом исследовании получены отдаленные результаты (год для первого больного): увеличение фракции выброса и улучшение симптоматики. В. Strauer с соавт. на 6-й день после развития острого трансмурального инфаркта трансплантировали больному СК костного мозга в окклюзированную коронарную артерию. Через 10 недель после трансплантации СК зона инфаркта уменьшилась с 24,6% до 15,7% поверхности левого желудочка. Сердечный индекс и ударный объем выросли на 20-30%, конечный диастолический объем при нагрузке снизился на 30%.

Польские клиницисты трансплантировали СК 10 больным с острым инфарктом миокарда. Авторы констатируют безопасность процедуры и отмечают, что спустя 5 месяцев после инфаркта миокарда у всех больных наблюдали увеличение фракции выброса левого желудочка. Авторы подчеркивают, что представленные материалы являются недостаточными для оценки эффективности и касаются только переносимости предлагаемого метода лечения.

Применение СК в неврологии и нейрохирургии.

Длительное время доминировало представление о том, что нервные клетки в головном мозге взрослой особи не делятся. И только в последние несколько лет доказано, что СК взрослого головного мозга могут формировать три главных типа клеток - астроциты, олигодендроциты и нейроны. Большое значение придают СК (в частности, стромальным) при лечении различных нейродегенеративных и неврологических заболеваний: болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, хореи Гентингтона, мозжечковых атаксий, рассеянного склероза и др. Болезнь Паркинсона вызывается прогрессирующей дегенерацией и потерей допамин-продуцирующих нейронов (ДП - нейронов), что приводит к развитию тремора, ригидности и гипокинезии. В нескольких лабораториях с успехом применяют методы, индуцирующие дифференцировку ЭСК в клетки со многими свойствами ДП - нейронов. После трансплантации СК, дифференцирующихся в ДП - нейроны, в головном мозге крыс с моделью болезни Паркинсона наблюдалась реиннервация головного мозга с высвобождением допамина и улучшением моторной функции.

G. Steinberg и соавт. из отдела нейрохирургии Стенфордского университета у крыс с моделью мозгового инсульта изучали выживаемость, миграцию, дифференцировку и функциональные свойства человеческих зародышевых нервных СК, вводимых животным в три разных участка тела, отличающихся по расстоянию от пораженного участка коры головного мозга. Через 5 недель после введения СК наблюдали миграцию клеток в область повреждения и их дифференцировку в нейроны. Результаты этого исследования свидетельствуют о потенциальной возможности использования СК в лечении мозгового инсульта.

В работах (Института биологии гена РАН, Институт биологии развития РАН, Институт акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН) выделены региональные нейтральные стволовые клетки плода человека, дана их подробная иммуно-гистохимическая характеристика, в том числе на проточном флюориметре. В опытах с трансплантацией стволовых нейральных клеток человека в мозг крыс была показана их приживляемость, миграция на достаточно большие расстояния и способность к дифференцировке. Последняя в значительной степени определяется микроокружением, в которое попадает трансплантат. Так, при трансплантации нейральных стволовых клеток человека, в ту область мозжечка крысы, где расположены клетки Пуркинье, они дифференцируются в направлении именно этого типа клеток, о чем свидетельствует синтез в них белка калбиндина, специфического продукта клеток Пуркинье.

Применение СК в эндокринологии.

Региональные СК существуют в поджелудочной железе в панкреатических протоках и островках Лангерганса. В нескольких последних сообщениях указывается, что СК, экспрессирующие нестин (который обычно рассматривается как маркер нервных клеток), могут генерировать все типы островковых клеток.

В настоящее время существует несколько подходов к созданию клона инсулин - продуцирующих клеток. В качестве исходного материала используют выделенные из человеческого трупа или полученные при биопсии поджелудочной железы в клетки и прогениторные клетки из панкреатических протоков.

Наиболее перспективным для получения инсулин-продуцирующих клеток считают использование эмбриональных клеток.

Испанские исследователи с помощью генной инженерии получили инсулин-продуцирующие клетки, которые трансплантировали мышам с диабетом. Через 24 ч содержание глюкозы у мышей снизилось до нормы. Спустя 4недели у 60% мышей уровень гликемии оставался нормальным, что свидетельствовало о приживлении трансплантированных клеток. Более того, клетки, продуцирующие инсулин, обнаружены у этих животных в селезенке и печени. Однако проблема заключается в том, что пока удается получить очень небольшое число инсулин - продуцирующих клонов.

Российскими биологами (Института биологии гена РАН, Харьковский институт криобиологии и фирма Вирола) разработана методика индукции в культуре стволовых стромальных клеток дифференцировки в направлении клеток, подобных клеткам островков Лангерганса, синтезирующим инсулин. Синтез этого белка был продемонстрирован с помощью современных методов молекулярной биологии и цитологии.

Интересно, что эти клетки формируют в культуре структуры, напоминающие островки Лангерганса. Они могут быть использованы для лечения диабета.

Применение СК в гепаталогии.

Много исследований посвящено изучению природы СК, которые могут восстанавливать печень взрослых млекопитающих. Работы, выполненные на грызунах, свидетельствуют о том, что СК костного мозга могут находиться в печени после ее повреждения и обнаруживают пластичность, превращаясь в гепатоциты. Е. Lagasse и соавт. вводили мышам с моделью печеночной недостаточности нефракционированные мышиные КСК. Введение этих клеток способствовало восстановлению показателей печеночных функций и увеличению выживаемости.

Применение СК в гематологии.

Одна из популяций костномозговых стволовых клеток - КСК ответственны за продукцию всех типов клеток крови. Эти клетки изучаю туже более 50 лет. К числу первых заболеваний, при которых стали использовать с лечебной целью КСК относятся, гемобластозы, острые лейкозы, хронический миелолейкоз, миеломная болезнь и др.

При перечисленных заболеваниях опухолевые гемопоэтические клетки разрушаются с помощью больших доз химиотерапии или общего облучения с последующим восстановлением нормального гемопоэза путем трансплантации аллогенных КСК.

Применение СК в лечении аутоиммунных болезней.

По аналогии с лечением гемобластозов изучают возможность использования КСК при некоторых аутоиммунных заболеваниях - системной красной волчанке, синдроме Съегрена, ревматоидном артрите, сахарном диабете типа 1 и рассеянном склерозе.

При перечисленных заболеваниях у больных собирались и замораживались КСК, затем пациенты получали высокодозированную химио-радиотерапию, после чего проводилась ауготрансплантация ранее замороженных КСК. После указанной процедуры в течение 3лет наблюдали 7 больных. На протяжении всего периода наблюдения у больных отсутствовали активные проявления болезни, и они не нуждались в иммуносупрессивной поддерживающей терапии.

Чрезвычайно перспективным представляется создание криобанка СК человека и организация соответствующей донорской службы.

Основной задачей криобанка СК человека является: обработка (уменьшение объема замораживаемого образца), удаление не определяющих дальнейшее применение клеточных элементов, смешивание скриоконсервантом и длительное, практически неограниченное во времени, хранение ранее заготовленных СК, вне зависимости от источника их получения.

Наиболее реальный на сегодня и практически неограниченный источник СК - пуповинная кровь.

Существуют криобанки СК с образцами для каждого родившегося ребенка, собранными из его пуповины и замороженными. При заболевании (онкологических, нарушениях иммунной системы, заболеваниях крови, мышц, кожи и т. д.) человек может воспользоваться трансплантацией собственных СК, которая включит механизмы самовосстановления поврежденных органов и систем. Сегодня в мире имеется несколько десятков таких официально зарегистрированных криобанков, примерно половина из них в США

Суммируя представленные данные о роли СК в организме человека, методах их выделения и использования, можно заключить, что изучение СК в любом аспекте представляется крайне актуальной научной проблемой, решение которой способно совершить качественный прорыв в медицине.